圖書信息
出版社:化學工業出版社出版時間:2008-3-1
版次:1
頁數:117
字數:144000
印刷時間:2008-3-1
開本:16開
紙張:膠版紙
印次:1
ISBN:9787122013774
包裝:平裝
內容簡介
本書是根據“細胞工程”專業課程的要求而編寫的實驗指導,全書包括細胞培養的基本知識、細胞培養的準備工作、正常細胞的培養技術和細胞培養的相關實驗技術等33個實驗,重點講解實驗過程中的基本原理、實驗方法與步驟。
本實驗指導與課程結合緊密,講解清楚明了,可用作醫學、生物學等專業的實驗教材,也可供相關實驗人員參考使用。
目錄
第一章 細胞培養的基本知識
一、 培養細胞的形態與結構
二、 培養細胞的生長方式和類型
三、 培養細胞的生長特點
四、 細胞的營養
五、 影響細胞生長的外在因素
第二章 細胞培養的準備工作
實驗一 細胞培養的設施及器材準備
實驗二 常用溶液、培養液及其配製
實驗三 細胞的復甦
實驗四 細胞的換液和傳代
實驗五 細胞的凍存
實驗六 細胞計數和細胞生長曲線測定
實驗七 四氮唑鹽(MTT)比色法
第三章 正常細胞的培養技術
部分章節
第一章 細胞培養的基本知識
一、 培養細胞的形態與結構
不同組織的細胞,由於內部構造不同、生理功能不同、所處環境和條件不同,因而形態上表現為多種多樣,如呈圓形、橢圓形、正方形、柱形、扁平形、梭形、星形和多邊形等。另外,也有些細胞(如吞噬細胞)沒有固定的形態。組織培養細胞的形態結構與體內細胞的形態結構基本相同。然而,由於細胞的生長方式不同導致其在大體形態及某些細微結構方面各有一定差異。如懸浮生長的細胞,不論細胞原來源於體仙何種類型細胞,因生長在液體環境中,胞內滲透壓高於周圍液體環境,因此,胞體基本呈圓形。呈貼附於支持物上生長的細胞,開始為圓形,很快過渡成扁平形,並逐漸恢復至原先的細胞形態。如來源於皮膚及其衍生物、乳腺、肝、消化道上皮等組織的細胞,由上皮性腫瘤(鱗狀細胞癌)等培養的細胞均呈上皮樣,上皮細胞形態為扁平的多角形,胞質近中央處有圓形的細胞核。上皮細胞緊密相靠、互相銜接成片,極性不明顯。起源於中胚層的細胞,體外培養似成纖維細胞型,如纖維結締組織、平滑肌、心肌、血管內皮、人胚肺等的細胞體外培養形態類似在體內生長的成纖維細胞,具有長短不等的數個細胞突起,因而多呈纖維狀、梭形,少數呈不規則的三角形或扇形,核為卵圓形,位二靠近胞質的中央。細胞排列為漩渦狀、放射狀或似柵欄狀。體外培養細胞類型見圖1-1。
在一般顯微鏡下直接觀察體外培養的細胞,細胞功能健康活躍時,細胞呈現均質而透明,結構極不明顯。用相差顯微鏡可看清細胞的輪郭和內部結構。細胞有1~2核仁,用因定染色法和特殊技術可顯示細胞器等結構。細胞功能狀態不良時,細胞輪郭會增強,反差增大。在胞質中出現顆料、脂滴和空泡等。