原理
聚凝胺是一種四胺聚合物 ,可中和紅細胞上的負電荷 ,降低 Zeta電位 ,縮短細胞間距離 ,形成一種可逆性非特異性的紅細胞凝聚現象。 當紅細胞與血清在低離子介質中孵育時 ,抗體與紅細胞相應抗原結合後 ,在聚凝胺的作用下出現肉眼可見的凝集 ,這種凝集同普通的凝聚現象從外表上是不能區分的 ,再加入重懸液 ,重懸液中的負電荷與聚凝胺上的正電荷中和 ,普通的凝聚現象消失 ,而真正的凝集不消失。
步驟
聚凝胺配血法 取試管 2支 ,標主次側 ,主側管加患者血清 (血漿 ) 2滴 ,加供血者 3 % ～ 5% 紅細胞懸液 (洗滌或不洗滌均可 ) 1滴 ,次側管反之。 各加 LIM 0.7ml,混合均勻後 ,再各加Polybrene溶液 2滴 ,並混合均勻。 用 BaSO血庫專用離心機1000g離心力 ,離心 10 s(若用普通離心機 ,離心條件為: 3400r/min,離心10s) ,然後把上清液倒掉,不要乾,讓管底殘留約 0.1ml液體。 輕輕搖動試管 ,目測紅細胞有無凝集 ,如無凝集 ,則必須重做。最後加入 Resuspending 2滴 ,輕輕轉動試管混合併同時觀察結果。如果在 30～ 60 s內凝集散開,代表是由 Polybrene引起的非特異性凝集 ,配血結果相合 ;如凝集不散開 ,則為紅細胞抗原抗體結合的特異性反應 ,配血結果不相合。 如反應可疑 ,可進一步倒在玻片上用顯微鏡觀察。 其他方法嚴格按照傳統的實驗步驟要求進行。
意義
聚凝胺交叉配血法能迅速檢出大多數意外血型抗體 ,可立即離心看結果 ,為安全輸血提供保障 ,具有簡便、快速和排除非免疫細胞聚合引起的假陽性等優點 ,對防止溶血性輸血反應有著極其重要的作用 ,是目前交叉配血最理想的方法。
