內容介紹
內 容 簡 介這是一本介紹細胞生物學實驗方法的書,內容包括從最基本的組織培養技
術,實驗胚胎手術,組化染色,同位素放射自顯術,染色體技術,電鏡技術,電
泳技術到近年來問世的雜交瘤單克隆抗體技術以及分子雜交技術。由於所選的方
法面很寬,所以適用範圍頗廣。另外,本書主要描述最常用的實驗方法與步驟,不
過多地研討理論問題,實用性乃是它最大的特色。這些方法都是根據編者自己的
經驗體會寫出來的,因此所描述的程式有較高的重複性與可靠性。本書適用於從
事生物科學,尤其是細胞生物學、分子生物學以及生物工程學的工作者閱讀和使
用,對於生物系大學生、有關科研單位等都是必備的工具書。
作品目錄
目 錄第一章 組織培養方法
一、人皮膚成纖維細胞的培養方法
二、人外周血淋巴細胞短期培養技術
三、人羊水細胞培養及染色體標本的製備
四、支持細胞的分離與培養
五、組織塊與組織塊的遭遇培養
六、細胞系與組織塊的遭遇培養
七、瓊脂培養法
八、血管壁平滑肌細胞和內皮細胞的培養
九、大鼠腺垂體細胞培養方法
十、神經細胞的分散培養
十一、人羊水細胞大量增殖培養及絨毛細胞培養技術
十二、培養細胞的電特性測定技術
十三、細胞骨架的光鏡制樣法
十四、建立永久性類淋巴母細胞樣細胞系方法
第二章 器官培養方法
一、灌流式器官培養法
二、瓊脂小島器官培養法
三、雞胚尿囊絨膜培養法
四、早期雞胚胚盤培養法
五、濾紙虹吸培養
六、搖擺式器官培養
七、格線法器官培養
八、雞胚上頜突上皮和間充質重組實驗
第三章 培養細胞增殖動力學的常用分析方法
一、生長曲線的繪製
二、分裂指數測定
三、成集落實驗
四、人體和哺乳動物細胞同步化方法
五、縮時顯微電影拍攝技術
六、人類腫瘤集落形成檢測與藥敏實驗
第四章 化學誘變及轉化實驗
一 誘導哺乳動物細胞次黃嘌吟鳥嘌呤磷酸核糖基轉移
酶位點正向突變的實驗方法
二、人白血病HL-60細胞系HGPRT缺失突變型細胞株的分離和建立
三、用N-甲基-N′-硝基-N-亞硝基胍在體外誘發金倉鼠乳鼠肺細胞的惡性轉化
四、DNA介導的基因轉移
第五章 培養細胞的藥物、放射敏感性及殺傷試驗
一、人癌細胞系對抗癌藥物的敏感性試驗
二、細胞培養的加溫實驗
三、細胞培養的X線照射試驗
四、細胞培養的微波照射試驗
五、高溫-光動力效應研究
六、LAK細胞的製備及其腫瘤細胞的殺傷試驗
七、MTT測定
第六章 染色體技術
一、小動物骨髓細胞染色體標本製作方法
二、人類皮膚成纖維細胞染色體標本製作方法
三、人實體瘤的細胞遺傳學分析
四、哺乳動物細胞減數分裂標本的簡易製作方法
五、成熟前聚集染色體標本製作方法
六、染色體Q帶顯帶法
七、BSG-C顯帶(C帶)技術
八、核仁組織區(NORs)Ag-AS二步鍍銀法
九、人類高分辨染色體技術
十、姊妹染色單體差別染色方法
十一、小動物體內顯示SCE方法
十二、顯示人體X染色體脆性位點的方法
十三、人類體細胞間期核內性染色質顯示方法
十四、動物細胞染色體掃描電鏡標本製備方法
十五、細胞中DNA的定量測定方法
十六、染色體分帶技術――G帶
十七、X小體顯示法
十八、一種改良的Y小體顯示法
十九、染色體原位雜交技術
二十、染色體R顯帶方法
二十一、人類精液的減數分裂相直接製備技術
二十二、用低滲處理來檢測人類精子膜功能完整性的方法
第七章 同工酶技術
一 同工酶的凝膠分離技術
二、用醋酸纖維素薄膜電泳法測定培養的動物細胞中的乳酸脫氫酶同工酶
三、LDH、G6PD同工酶分離技術
四、膠原的SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳
五、高活性L-谷氨酸脫氫酶的製備
六、培養內皮細胞的聚丙烯醯胺凝膠電泳技術
第八章 單克隆抗體技術
一、人絨毛膜促性腺激素(hCG)單克隆抗體的製備
第九章 放射性自顯技術及液閃測定技術
一、培養細胞的同位素自顯術
二、器官培養的同位素自顯術
三、整體動物的放射性同位素自顯術
四、同位素雙標記技術
五、染色體放射自顯影標本製備方法
六、同位素液閃測定
七、原位雜交技術
八、放射受體結合測定法
九、非放射性標記檢測體系
十、組織和血液細胞內環核苷酸水平的放射免疫分析法
十一、淬滅校正的內標準源法
十二、睪丸生精細胞動力學及蛋白質代謝放射自顯影技術
十三、非同位素染色體原位雜交技術
十四、同位素液閃法檢測程式外DNA合成
十五、DNA合成抑制試驗
十六、DNA修複試驗
十七、鹼性洗脫螢光法檢測DNA單鏈斷裂和DNA蛋白質交聯試驗
第十章 細胞化學染色法
一、培養細胞的活體染色方法
二、定量細胞化學技術――顯微分光光度計吸收測量法
三、免疫細胞化學技術
四、免疫螢光染色技術的套用
五、單細胞懸液染色標本的多信息分析法――流式細胞光度術
六、苦味酸天狼星紅――偏振光法
七、生物素――抗生物素蛋白體系過氧化物酶染色法
八、生物素――抗生物素蛋白體系DCS間接免疫螢光法
九、哺乳類精子細胞嗜銀結構的顯示技術
十、小鼠精子頭部銀染異常的檢測方法
十一、用纖維蛋白自顯影系列鑑定內皮細胞釋放的PA和PAI
第十一章 電鏡技術
一、掃描電子顯微鏡的生物學標本製作技術
二、培養細胞透射電子顯微鏡標本製備技術
三、冷凍蝕刻電鏡技術
四、快速HE冰凍切片Sheehan染色法
五、掃描隧道顯微鏡及其生物學套用
六、一種觀察核基質-中間纖維的簡易整裝電鏡制樣法
七、細胞核骨架製備技術
第十二章 細胞和細胞器及間質的分離技術
一、細胞的分離
二、微粒體的分離與純化
三、細胞核的分離
四、溶酶體的分離
五、鼠肝微粒體酶的製備方法
六、染色體的分離方法
七、DNA的分離與純化
八、從培養哺乳動物細胞中分離DNA的方法
九、纖維連線蛋白的提取
十、層粘連線蛋白的提取
十一、鹼洗脫螢光法檢測細胞DNA交聯性損傷
十二、彈性蛋白的分離提取
十三、膠原蛋白的分離提取
十四、人類和哺乳動物細胞同步化方法
十五、細胞及亞細胞組分分離技術
十六、細胞膜的分離技術
十七、線粒體的製備
十八、大鼠肝染色質小分子多肽的提取
十九、小鼠線粒體DNA的快速製備方法
二十、從組織與培養的細胞中分離RNA的方法
第十三章 體外受精技術
一、異種體外受精方法
二、同種體外受精方法
三、人精子單倍體染色體製作法
四、人精子冷凍保存技術
五、精子細胞生物學技術
第十四章 早期雞胚的實驗胚胎學技術
一、早期雞胚原結的胚內誘導實驗
二、早期雞胚原結的離體誘導實驗
三、胚胎冷凍保存技術
第十五章 核酸分子雜交及電泳技術
一、核酸分子雜交術
二、蛋白質的雙向電泳
三、糖胺聚糖的提取及醋酸纖維素膜電泳法
四、原位缺口移位技術
五、聚合酶鏈反應(PCR)技術
六、PCR技術在法醫學中的套用
七、DNA指紋(DNAfingerprinting)分析技術
八、基因文庫的建立及用減除雜交法篩選基因文庫
第十六章 實驗動物遺傳監測技術
一、小鼠遺傳純度的快速鑑定――尾部植皮法
二、大鼠品系定型血清的製備
三、微量淋巴細胞毒實驗
四、近交系小鼠 大鼠的生化基因標誌的鑑別