簡介
本書在第一版、第二版多年使用的基礎上進行了修訂,增加了生物化學和分子生物學方面的一些新方法、新技術。全書共98個實驗,內容設定與《普通生物化學》教材一致,包括糖、脂、蛋白質、核酸、酶、維生素、激素、生物代謝與生物氧化,非常適合作為本科教學的同步教材。本書內容全面,包含一些綜合性和較大型的實驗,供不同學校、不同專業根據具體條件選用。本書力求結構清晰簡潔,表達嚴謹規範,讓學生易學好用。
本書可作為高等院校生物類各專業大學生的生物化學實驗教材,也可供有關教師和科研人員參考。
目錄:
第一章 糖類
實驗一 糖的顏色反應
實驗二 糖的還原作用
實驗三 血糖的定量測定(Folin-Wu法)
實驗四 血糖的定量測定(Folin-Malmros法)
實驗五 血液中葡萄糖的測定(鄰甲苯胺法)
實驗六 蒽酮比色定糖法
實驗七 植物組織中總糖和還原糖含量的測定
實驗八 多糖的試驗
實驗九 肝素鈉的定量測定
實驗十 糖的旋光性和變旋現象
第二章 脂類
實驗十一 脂肪的組成
實驗十二 卵磷脂的提取和鑑定
實驗十三 粗脂肪含量的測定(索氏抽提法)
實驗十四 碘價的測定(Hanus法)
實驗十五 皂化價的測定
實驗十六 脂肪酸價的測定
實驗十七 脂肪乙醯價的測定
實驗十八 血清膽固醇的定量測定(磷硫鐵法)
實驗十九 血清總膽固醇的測定(鄰苯二甲醛法)
實驗二十 血清膽固醇的定量測定(醋酸酐法)
實驗二十一 血清甘油三酯簡易測定法
實驗二十二 丙二醛(MDA)的測定
第三章 蛋白質
實驗二十三 蛋白質的顏色反應
實驗二十四 蛋白質的沉澱反應
實驗二十五 微量克氏(Kjeldahl)定氮法
實驗二十六 非蛋白氮(NPN)的測定
實驗二十七 甲醛滴定法
實驗二十八 雙縮脲法測定蛋白質濃度
實驗二十九 福林(Folin)-酚試劑法測定蛋白質濃度
實驗三十 紫外光吸收法測定蛋白質濃度
實驗三十一 考馬斯亮藍結合法測定蛋白質濃度
實驗三十二 DNP-胺基酸的製備和鑑定
實驗三十三 DNS-胺基酸的製備和鑑定
實驗三十四 用DNS法鑑定蛋白質或多肽的N-端胺基酸
實驗三十五 用DNS法測定多肽的胺基酸組成
實驗三十六 肽的序列分析(PTH法)
實驗三十七 甲硫氨醯甘氨酸二肽的合成
實驗三十八 尿素對蛋白質的變性作用
實驗三十九 胺基酸紙層析法
實驗四十 胺基酸微晶纖維素薄板層析法
實驗四十一 離手交換柱層析法分離胺基酸
實驗四十二 血清白蛋白的分離與純化
實驗四十三 凝膠層析法分離純化蛋白質
實驗四十四 DEAE-Sephadex A-25分離純化多肽
實驗四十五 親和層析法分離純化單克隆抗體
實驗四十六 醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質
實驗四十七 血清糖蛋白醋酸纖維薄膜電泳
實驗四十八 聚丙烯醯胺凝膠圓盤電泳法分離血清蛋白質
實驗四十九 聚丙烯醯胺凝膠垂直平板電泳法鑑定胰島素
實驗五十 SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳法測定蛋白質的相對分子質量
實驗五十一 用等電聚焦電泳法測定蛋白質等電點
實驗五十二 對流免疫電泳法測定胎兒甲種蛋白質
實驗五十三 火箭免疫電泳法
實驗五十四 Western印跡
第四章 核酸
實驗五十五 核酸的定量測定(定磷法)
實驗五十六 酵母RNA的提取
實驗五十七 RNA的定量測定(苔黑酚法)
實驗五十八 動物肝臟中DNA的提取
實驗五十九 DNA的定量測定(二苯胺法)
實驗六十 5''-核苷酸的定量測定(過碘酸氧化法)
實驗六十一 DEAE-纖維素薄板層析法測定核苷酸
實驗六十二 腺苷三磷酸的定量測定(紙電泳法)
實驗六十三 核酸的酶法降解以及葡聚糖凝膠層析法製備5''-單核苷酸
實驗六十四 質粒DNA的提取
實驗六十五 DNA瓊脂糖凝膠電泳
第五章 酶
實驗六十六 過氧化氫酶的作用
實驗六十七 過氧化物酶的作用
實驗六十八 細胞色素氧化酶的作用
實驗六十九 乳酸脫氫酶及其輔酶的作用
實驗七十 激活劑和抑制劑對酶活力的影響
實驗七十一 酵母醇脫氫酶的提純
實驗七十二 醇脫氫酶的專一性
實驗七十三 酵母醇脫氫酶的動力學研究
實驗七十四 胰蛋白酶米氏常數的測定
實驗七十五 膽鹼酯酶米氏常數的測定
實驗七十六 過氧化氫酶米氏常數的測定
實驗七十七 用正交法測定幾種因素對酶活力的影響
實驗七十八 溶菌酶的提純結晶和活力測定
實驗七十九 豬胰糜蛋白酶的製備和純度鑑定
實驗八十 疏水層析分離純化α-澱粉酶
實驗八十一 α-澱粉酶的活力測定
實驗八十二 大腸桿菌鹼性磷酸酶的製備
實驗八十三 鹼性磷酸酶的提取和分離及比活力測定
實驗八十四 瓊脂糖膠電泳法分離乳酸脫氫酶同工酶
實驗八十五 聚丙烯醯胺凝膠電泳法分離乳酸脫氫酶同工酶
實驗八十六 肝臟谷丙轉氨酶活力測定
實驗八十七 血清谷丙轉氨酶活力測定
實驗八十八 固定化5''-磷酸二酯酶的製備及其在分離核苷酸中的套用
第六章 維生素
實驗八十九 維生素A的定性測定
實驗九十 維生素B1的定性測定
實驗九十一 維生素C的定量測定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
實驗九十二 維生素C的定量測定(磷鉬酸法)
實驗九十三 核黃素(VB2)螢光光度定量測定法
實驗九十四 螢光法測定核黃素結合蛋白-核黃素的解離常數
第七章 激素
實驗九十五 尿中17-羥皮質類固醇的測定(Porter-Silber法)
第八章 生物代謝與生物氧化
實驗九十六 華氏(Warburg)呼吸儀瓶常數的測定
實驗九十七 L-谷氨酸的酶促脫羧作用(測壓法測定L-谷氨酸)
實驗九十八 發酵過程中無機磷的被利用和ATP的生成(ATP的生物合成)
附錄
一、生物化學實驗須知
二、玻璃儀器的洗滌及一些常用的洗滌劑
三、移液器的使用
四、吸管的使用
五、過濾和離心
六、722型分光光度計的使用
七、93型螢光光度計的使用
八、UV-91型紫外可見分光光度計的使用
九、實驗室常用酸鹼的比重和濃度
十、常用酸鹼指示劑
十一、緩衝液的配製
十二、恆沸鹽酸的製備
十三、大腸桿菌丙酮粉的製備
十四、生物化學中某些重要化合物的Mr及pK值
十五、胺基酸的一些物理常數
十六、某些蛋白質的物理性質
十七、化學元素的相對原子質量表
十八、離心機轉速與相對離心力的換算
十九、硫酸銨飽和度的常用表
二十、常用離子交換劑
二十一、常用凝膠過濾層析介質
二十二、汞的密唐