七葉靈水解試驗

七葉靈水解試驗（Bile Esculin Test）是微生物生化鑑定試驗的一種，其原理是依據待檢測的細菌是否具有水解七葉靈的能力。陽性反應主要用於鑑別D群鏈球菌和腸球菌（Enterococci），例如糞腸球菌（Enterococcus faecalis）、屎腸球菌（Enterococcus faecium）和牛鏈球菌（Streptococcus bovis）等。

原理

微生物在生長代謝七葉靈的過程中會產生深棕色的代謝產物七葉甙原（ esculetin）產生可觀察的顏色反應。七葉靈水解試驗呈陽性的微生物可以裂解七葉靈分子，釋放出葡萄糖分子和七葉甙原。其中葡萄糖分子被微生物利用，作為碳源供能，而七葉甙原分子與培養基中的三價鐵離子反應形成黑色的酚醛鐵複合物（ phenolic iron complex）使培養基變色。

操作方法

七葉靈水解試驗常依靠商業化的膽汁七葉苷瓊脂（bile esculin agar）完成。其中的膽汁成分可以抑制除了D群鏈球菌和腸球菌以外的其他革蘭氏陽性菌生長，如果額外添加疊氮化鈉，還可以抑制革蘭氏陰性細菌的生長。

1、將純化的菌落或培養純化菌落得到的菌液，劃線接種到含有膽汁七葉苷瓊脂的斜面培養基上（不必穿刺培養）。

2、在35~37℃培養24小時，即可進行結果觀察。

3、若菌落生長茂盛，則判定為膽汁抑制生長（growth in the presence of bile）結果陽性。

4、若培養基呈現深棕色顏色變化，則判定為七葉靈水解試驗陽性。