AG-490

AG-490 (Tyrphostin B42)是一種EGFR抑制劑，在無細胞試驗中IC50為0.1 μM，作用於EGFR比作用於ErbB2選擇性高135倍，對JAK2也有抑制作用，對Lck，Lyn，Btk，Syk和Src沒有抑制活性。

描述

AG-490是酪氨酸激酶抑制劑，其抑制EGFR，Stat-3和JAK2/3。AG-490(TyrphostinB42)是一種EGFR抑制劑，IC50為0.1μM，作用於EGFR比作用於ErbB2選擇性高135倍，對JAK2也有抑制作用，對Lck，Lyn，Btk，Syk和Src沒有抑制活性。

化學信息

別名：TyrphostinAG490純度：99.84%分子量：294.30
分子式：C₁₇H₁₄N₂O₃CAS號：133550-30-8SMILES：O=C(NCC1=CC=CC=C1)/C(C#N)=C/C2=CC=C(O)C(O)=C2.[(E)]穩定性：3years-20°Cpowder /2years-80°Cinsolvent

生物活性

靶點：EGFR (Cell-freeassay)AG-490抑制EGF依賴的HER14細胞增殖，IC50為3.5μM。與特異性作用於

AG-490生物數據1

前B細胞急性白血病（ALL）細胞抑制組成型激活的JAK2相一致，5μM AG-490通過誘導程式性細胞死亡，幾乎完全抑制所有ALL細胞生長，而對正常造血功能不會造成有害影響。AG-490不會抑制Lck,Lyn, Btk,Syk,和Src激活。[2]AG-490(60-100μM)抑制Stat3sm組成型激活，且抑制自發的或白細胞介素2誘導的蕈菌(MF)腫瘤細胞生長，IC50分別為75μM和20μM。通過抑制JAK3和STAT5a/b.的活性，AG-490有效抑制IL-2調節的人T細胞生長，IC50為25μM。 雖然5μMAG-490單獨給藥處理對FDrv210H細胞增殖沒有效果，但是AG-490可以協同STI571而增強STI571抑制p210bcr-abl促進增殖的效果。AG-490作用於MOPC,MPC11,和S194細胞,顯著抑制Stat3組成型激活，導致顯著的細胞凋亡，這種作用存在劑量依賴性。AG-490(100μM)抑制Akt磷酸化,抑制核因子-κB激活,且激活GSK-3β,導致c-Myc降低。AG-490(50μM)可以誘導表達Bcr-Abl突變型T315I和E255K的抗Imatinib的BaF3細胞凋亡。30μMAG-490不僅抑制Epo誘導的野生型JAK2磷酸化，也抑制組成型的JAK2V617F突變型磷酸化。AG-490作用於BaF3細胞，有效抑制JAK2V617F突變誘導的細胞因子非依賴的細胞生長。
AG-490處理，大幅降低CD45+和HLA-DR+細胞數，作用於骨髓時，這兩種細胞數分別從48%和46%降低到不可檢測水平，作用於未處理小鼠脾臟時，這兩種細胞數分別從38%和22%降低到不可檢測水平。在體內，AG-490處理，引起小鼠骨髓瘤細胞凋亡，但是不抑制IL-12誘導的巨噬細胞活化和IFN-γ產量。與在體外抑制JAK2V617F突變活性一致，AG-490每天按0.5mg處理裸鼠10天，高效抑制JAK2V617F突變誘導的腫瘤形成和腫瘤細胞入侵 。

作用機制

AG490在膀胱癌中的抗癌效應及其機制

方法：套用不同劑量AG490處理膀胱癌細胞系BIU87，台盼藍排斥試驗檢測細胞活力，

AG-490生物數據2

噻唑藍比色試驗檢測細胞增殖，克隆形成試驗進一步檢測膀胱癌細胞系幹細胞對藥物的敏感性，Hoechst33258/PI螢光雙染檢測細胞凋亡特徵，流式細胞儀檢測細胞周期和凋亡，Western blot檢測pJAK2、STAT3、pSTAT3、CyclinD1、bclxL蛋白表達水平；並建立膀胱癌荷瘤模型，觀察AG490體內抗腫瘤作用。結果：AG490明顯抑制膀胱癌細胞增殖和幹細胞克隆形成，使細胞周期阻滯，促進膀胱癌細胞凋亡；並可使pJAK2、STAT3、pSTAT3、Cyclin D1、bclxL蛋白表達水平明顯下降。裸鼠移植瘤在AG490的作用下明顯縮小。結論：AG490通過阻斷STAT3信號通路，抑制膀胱癌細胞的增殖，促進其調亡。

AG-490對人慢性髓系白血病急變細胞株K562細胞增殖凋亡的影響

方法：採用MTT法觀察AG-490在體外對人慢性髓系白血病急變細胞株K562細胞增殖的影響,光學顯微鏡下觀察AG-490對K562細胞形態的變化,流式細胞術檢測AG-490對K562細胞凋亡及細胞周期的影響,逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)及實時螢光定量PCR技術檢測AG-490作用後K562細胞bcr/abl融合基因及凋亡相關基因c-mycmRNA的表達水平。結果：AG-490可明顯抑制K562細胞的增殖,並隨藥物作用時間的延長和濃度的增加,抑制作用越明顯(P0.05);AG-490可使細胞周期阻滯於G1期,促使其凋亡(P0.05)。AG-490作用於K562細胞48 h後bcr/abl融合基因的表達無明顯改變(P0.05),而c-myc的表達水平明顯降低(P0.05)。結論：AG-490可能通過阻斷JAK2信號通路而下調c-myc的表達,使K562細胞阻滯於G1期,從而抑制K562細胞增殖,促使其凋亡。

AG490抑制甲狀腺髓樣癌TT細胞增殖並提高其放射敏感性

方法：採用(0、25、50、100)μmol/L AG490處理甲狀腺髓樣癌TT細胞,MTT法和流式細胞術進行細胞增殖和凋亡檢測,克隆形成實驗檢測其放射敏感性、Western blot法檢測各組細胞Janus激酶2(JAK2)、磷酸化的信號轉導子與轉錄激活子3(p-STAT3)、Bcl-2、Bax蛋白表達。結果：與對照組相比,(25、50、100)μmol/L AG490組的抑制作用增強,呈濃度和時間依賴性;隨著AG490藥物濃度的增加凋亡率逐漸增加;與對照組相比,50μmol/L組細胞存活率顯著降低,放射生物學參數:射線為2Gy時的存活分數(SF2)、平均致死劑量(D0)、準閾劑量(Dq)和外推數(N)降低;D0時放射增敏比(SERD0)、Dq時放射增敏比(SERDq)則增加。Western blot結果顯示JAK2、p-STAT3和Bcl-2的蛋白表達量隨著藥物濃度的升高而逐漸降低,Bax蛋白表達量隨著藥物濃度的升高而逐漸增加。結論：AG490可抑制甲狀腺髓樣癌TT細胞增殖、增加細胞凋亡、提高放射敏感性。