圖書信息
作 者：鄭月茂 等編著
出 版 社：科學出版社
出版時間：2012-4-1
版 次：1
內容簡介
轉基因克隆技術是目前生物技術領域的前沿高新技術，它是在體細胞克隆的基礎上，集成基因工程等多項技術發展起來的一項多學科交叉的新技術。鄭月茂主編的《轉基因克隆動物理論與實踐》介紹了基因與基因工程、動物克隆技術和理論、動物轉基因技術、目的基因的分離、轉基因細胞的製備、卵母細胞體外成熟、胚胎體外培養和冷凍保存、轉基因克隆胚胎移植與附植、轉基因動物的檢測和安全性評價等方面的內容。 《轉基因克隆動物理論與實踐》可作為本科及研究生教學和科研參考用書，亦可供高等院校生命科學、生物工程、生物製藥、生物化工等專業的師生及科研人員使用。
目錄
前言
緒論
第1章 基因與基因工程
1．1 基因
1．1．1 基因的基本結構特徵
1．1．2 基因表迭調控
1．1．3 基因打靶與基因沉默
1．2 基因工程
1．2．1 基因工程定義
1．2．2 基因工程工具酶
1．2．3 基因克隆載體
1．2．4 基因工程基本操作步驟
1．2．5 基因工程歷史
1．2．6 基因工程套用
第2章 動物克隆技術和理論
2．1 動物克隆技術發展簡介
2．1．1 動物胚胎分割技術
2．1．2 動物細胞核移植技術
2．2 動物克隆技術的基本原理
2．2．1 胚胎分割的基本原理
2．2．2 細胞核移植的基本原理
2．3 動物克隆技術
2．3．1 顯微操作器械
2．3．2 胚胎分割
2．3．3 細胞核移植
2．4 動物克隆理論
2．4．1 受體胞質對供體核的重編程
2．4．2 核質互作
2．4．3 核移植的線粒體問題
2．4．4 哺乳動物的表現遺傳學調控
2．4．5 DNA甲基化與動物克隆
2．4．6 基因組印記與動物克隆
2．5 小結
第3章 動物轉基因技術
3．1 動物轉基因技術和克隆技術的區別
3．2 動物轉基因技術
3．2．1 原核期胚胎的顯微注射技術
3．2．2 逆轉錄病毒栽體侵染技術
3．2．3 慢病毒栽體技術
3．2．4 精子載體技術
3．2．5 體細胞核移植技術
3．2．6 ES細胞介導技術
3．2．7 胞內單精注射技術
3．2．8 受體介導的基因轉移
3．3動物轉基因新技術研究進展
3．3．1 PGCs技術
3．3．2 精原幹細胞法
3．3．3 基因打靶技術
3．3．4 RNA干擾(RNAi)介導的基因沉默技術
3．3．5 誘導多能幹細胞轉基因技術
3．3．6 人工染色體法
3．3．7 雙順反子條件表達轉基因系統法
3．3．8 問題與展望
3．4 外源重組基因導人動物細胞的其他方式
3．4．1 電穿孔法
3．4．2 基因槍法
3．4．3 超音波法
3．4．4 磷酸鈣或DEAE-葡聚糖轉染法
3．4．5 脂質體介導轉化法
3．4．6 動物病毒介導轉導法
3．5 提高轉基因效率的策略
3．5．1 外源基因的整合機制
3．5．2 轉基因表達載體的構建
3．6 轉基因技術存在的問題
3．6．1 成本高、整合效率總體比較低
3．6．2 轉基因表達水平低
3．6．3 難以控制轉基因在宿主基因組中的行為
3．6．4 目的基因與動物生產性狀的多基因矛盾突出
3．6．5 轉基因動物及其產品的安全性問題
第4章 目的基因的分離
4．1 核酸的製備
4．1．1 DNA的製備
4．1．2 RNA的製備
4．1．3 人工合成核酸片段
4．1．4核酸樣品的分析與檢測
4．2 基因文庫的構建
4．2．1 原核生物基因組文庫的構建
4．2．2 真核生物基因組文庫的構建
4．2．3 cDNA基因文庫的構建
4．3 目的基因的分離
4．3．1 從基因文庫中篩選分離目的基因
4．3．2 利用聚合酶鏈反應技術擴增目的基因
4．3．3 利用差示分析法分離目的基因克隆
4．3．4 套用基因定位克隆技術分離篩選目的基因
4．3．5 標籤測序法分離目的基因
4．3．6 基因的酶法合成
第5章 轉基因細胞的製備
5．1 受體細胞的類型
5．1．1 原核受體細胞
5．1．2 絲狀真菌受體細胞
5．1．3 酵母受體細胞
5．1．4 動物受體細胞
5．2 重組基因導入原核受體細胞的主要途徑
5．2．1 轉化
5．2．2 轉導
5．2．3 轉染
5．2．4 電穿孔
5．2．5 三親本雜交
5．3 重組基因導人動物受體細胞
5．4 重組子篩選
5．4．1 遺傳表型直接篩選
5．4．2 依賴於重組子結構特徵分析篩選
5．4．3 核酸分子雜交分析
5．4．4 免疫化學分析檢測
5．4．5 PCR篩選法
5．5轉基因細胞的檢測
5．5．1 目的基因的整合檢測
5．5．2 目的基因的表達檢測
5．5．3 其他檢測
5．5．4 轉基因細胞的核型分析
第6章 卵母細胞體外成熟
6．1 卵母細胞發育生物學特性
6．1．1 卵泡發育和排卵
6．1．2 卵母細胞卵膜的發生髮育
6．1．3 卵泡細胞在卵母細胞發育中的作用
6．1．4 卵母細胞發育及成熟過程中超微結構的變化
6．2 卵母細胞體外成熟
6．2．1 卵母細胞體外成熟培養概況
6．2．2 卵母細胞成熟的機理
6．2．3 卵母細胞成熟培養
6．2．4 影響卵母細胞體外成熟的因素
第7章 胚胎體外培養和冷凍保存
7．1 胚胎體外培養
7．1．1 簡單化學限定培養液
7．1．2 共同培養系統
7．1．3 添加肽類生長因子的培養系統
7．1．4 早期胚胎體外發育的影響因素
7．2 胚胎冷凍保存
7．2．1 胚胎冷凍保存的發展簡史
7．2．2 胚胎冷凍保存的意義
7．2．3 胚胎冷凍的基本原理
7．2．4 胚胎冷凍及解凍的基本方法
7．2．5 胚胎冷凍效果的鑑定
第8章 轉基因克隆胚胎移植與附植
8．1 胚胎移植
8．1．1 胚胎移植概述
8．1．2 轉基因克隆胚胎移植的準備
8．1．3 受體的同期發情
8．1．4 轉基因克隆胚胎移植
8．2 附植
8．2．1 胚泡遷移、定位和植入
8．2．2 附植中的妊娠識別及其機理
第9章 轉基因動物的檢測和安全性評價
9．1 轉基因動物的檢測
9．1．1 外源基因存在的檢測
9．1．2 外源基因拷貝數的檢測
9．1．3 外源基因整合位點數的檢測
9．1．4 外源基因整合位點基因組序列的檢測
9．1．5 轉基因表達的檢測
9．1．6 轉基因動物檢測中存在的問題和展望
9．2 轉基因動物的安全性評價
9．2．1 轉基因動物安全性檢測的內容和方式
9．2．2 轉基因動物研究及其產品的安全性評價
9．2．3 轉基因動物食品的安全性評價
參考文獻
