解摺疊

解摺疊解摺疊
光合作用系統II外周蛋白—23kD蛋白(以P23k表示)以及重組豬胰島素前體(以rPIP表示)的摺疊/解摺疊。

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我們用高壓力技術結合螢光光譜學等方法在不同的實驗條件下系統地研究了P23k摺疊/解摺疊。熱力學研究表明,該蛋白質對壓力非常敏感,極易被高壓力解摺疊。在20℃,pH5.5的條件下,180MPa即可使該蛋白質完全解摺疊,這個壓力遠遠低於迄今為止有關研究中大多數天然蛋白質完全解摺疊所需要的壓力。經計算P23k的解摺疊的自由能與標準體積變化分別為5.6kcal/mol和–150.3ml/mol。研究表明NaCl和蔗糖等蛋白穩定劑確實可以增加蛋白質在壓力下的穩定性,但有意思的是,我們發現這種穩定作用的機理除了與Timashiff已提出的NaCl等由於增加了蛋白質分子的表面張力從而可以提高蛋白質的自由能理論有關外,而且還與NaCl等引起的蛋白質解摺疊標準體積變化(?Vu)的減少相關。壓力躍變(pressurejump)研究揭示該蛋白質的解摺疊反應的活化體積為負值.

可逆可解摺疊多肽(如,受熱時解摺疊,冷卻時重摺疊),涉及包含可逆可解摺疊多肽,並涉及含可逆可解摺疊多肽或編碼可逆可解摺疊多肽核酸的文庫。本發明還涉及製備富含可逆可解摺疊多肽或編碼可逆可解摺疊多肽核酸文庫的方法。本發明涉及選擇和/或分離可逆可解摺疊多肽的方法,涉及製備可逆可解摺疊多肽的方法。

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