染料結合法

染料結合法dye-binding method一種測定蛋白質的方法。

利用來源相同的蛋白質和鹼性〔或酸性)胺基酸含量大體相同這一特點,加人過量的酸性(或鹼性)染料,使其和蛋白質形成不溶性鹽而沉澱析出,以分光光度計測定反應前後溶液的透明度,然後根據計算出來的結合染料量求得蛋白質含量。通常用精製的酸性橙12配成試劑染料溶液、在480nm波長下測定透光度。該法操作較簡單,如樣品來源相同,可同時進行多個樣品的測定,靈敏度也較高,但染料與蛋白質的反應較複雜,操作方法和實驗條件必須標準化,蛋日質總鹼性基團與染料之間才符合化學計量的關係。由於不同染料與樣品中蛋白質的結合力不同,有時還有非特異性的吸著,所以必須注意選擇合適的染料。這個方法不能用於不同來源蛋白質的比較定量。

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